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基于功能蛋白质组学的ABPP技术(Activity-Based Protein Profiling,活性基蛋白质谱分析),可用于在复杂的生物样本中检测、富集和鉴定具有催化活性的酶蛋白。本文将从ABPP技术的原理出发,系统解析其优势与局限,并探讨其在生命科学中的典型应用场景。 一、ABPP技术原理简
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Activity-Based Protein Profiling(ABPP)实验流程涉及从探针设计、样本处理,到信号检测和数据分析的多个关键步骤。以下是标准ABPP实验流程及每一步的操作要点,适用于大多数酶类研究(如丝氨酸酯酶、蛋白酶、脱酰化酶等)。 一、ABPP实验流程概览 1、活性探针准备 2
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一、什么是ABPP? ABPP(Activity-Based Protein Profiling,活性基础蛋白质谱分析)是基于化学探针的蛋白质组学技术,专门用于检测酶类蛋白的“活性状态”,而非仅仅关注其表达水平。ABPP使用活性探针(Activity-Based Probes
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鸟枪法蛋白质组学(Shotgun Proteomics)是当前蛋白质组研究中应用最广泛的策略之一。它通过将复杂蛋白混合物酶解成肽段,并结合液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)实现大规模蛋白质鉴定与定量,广泛用于疾病机制解析、生物标志物筛选及功能蛋白研究。本文系统梳理鸟枪蛋白质组学从样本处理到数
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生物标志物是实现早期诊断、疾病分型和个体化治疗的关键工具。随着质谱技术的快速演进,蛋白质组学已成为标志物发现的重要手段。其中,鸟枪法蛋白质组学(shotgun proteomics)因其高通量、无偏倚、覆盖广等优势,在复杂样本的标志物筛选中展现出巨大潜力。 一、鸟枪法蛋白质组学概述 ※ 技术原理
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在蛋白质组学中,鸟枪法(Shotgun Proteomics)依托高通量质谱分析技术,成为主流的全蛋白质组定性手段。其中,数据依赖采集(Data-Dependent Acquisition, DDA)是最早被广泛采用的采集模式,至今仍在新蛋白鉴定和探索性研究中发挥核心作用。本文将系统解析DDA的工作
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