蛋白质的 N 端和 C 端测序是确定蛋白质一级结构中两端氨基酸序列的技术手段。N端测序，即氨基端测序，指的是识别蛋白质的初始氨基酸序列的方法。而C端测序，则是识别蛋白质的羧基端氨基酸序列的方法。N端测序和C端测序的应用广泛，可用于确定蛋白质的完整序列，辅助解析蛋白质的空间结构与功能关系，通过分析 N 端或 C 端序列变化研究蛋白质的翻译后修饰，在蛋白质工程中指导对蛋白质的定向改造，还能用于判断蛋白质在细胞内的定位与转运情况，在疾病诊断方面可作为生物标志物用于疾病的早期检测，在药物研发领域帮助设计和优化药物靶点以及评估药物作用机制等。此外，某些遗传疾病的诊断也依赖于对特定蛋白质序列的识别。

一、N端和C端测序的常见方法

1、Edman降解法

Edman降解法是经典的N端测序方法，通过化学反应逐步去除蛋白质的N端氨基酸，并通过色谱分析进行鉴定。这种方法的优点是可以高精度地识别蛋白质的N端序列，但处理过程相对复杂。

2、质谱分析

质谱分析在C端测序中应用广泛。通过质谱法，蛋白质被离子化并根据质量电荷比进行分析，从而识别C端氨基酸序列。质谱法具有高灵敏度和快速分析的优势，是现代蛋白质测序的首选方法之一。

二、技术流程

1、样品制备

在N端和C端测序中，对样品的制备至关重要。样品需纯化，确保目标蛋白质的高纯度，以避免其他蛋白质或杂质的干扰。

2、酶解与化学修饰

在某些测序方法中，蛋白质需经过特定酶或化学试剂的处理，以暴露N端或C端。

3、数据分析

通过特定的软件和算法，对测序数据进行处理和分析，得到精确的氨基酸序列。

三、注意事项

1、样品纯度

样品的纯度直接影响测序的准确性，任何杂质都可能导致错误的序列识别。

2、测序条件

不同的测序方法对反应条件（如pH值、温度）有严格要求，需谨慎控制。

3、数据解读

测序结果的解读需要丰富的经验，特别是在序列复杂或有修饰的情况下。

四、常见问题

1、序列末端的修饰

某些蛋白质的N端或C端可能有化学修饰，影响测序结果，需要预先处理。

2、蛋白质降解

在测序过程中，蛋白质可能发生降解，应采取措施防止降解的发生。

N端和C端测序方法能够提供精确的蛋白质序列信息，是蛋白质功能研究不可或缺的工具。百泰派克生物科技提供领先的N端和C端测序服务，致力于为客户提供高效和精准的蛋白质序列分析。无论是在基础研究还是应用开发中，我们的测序服务都能满足您的需求。选择百泰派克，您将获得专业的技术支持与优质服务。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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